• 林俊杰人在美国忙里偷闲挥汗如雨备战火炬接力 不要轻易放弃。学习成长的路上,我们长路漫漫,只因学无止境。


    相关医学生物化学论文 重组人载脂蛋白CⅢ在毕赤酵母中表达的 非病毒载体融合蛋白基因的克隆、表达及 C2C12骨骼肌细胞中胰岛素刺激下Ca~(2 多效生长因子Pleiotrophin对Schlafen2 Nm23 胍基化聚乙烯亚胺非病毒转基因载体 优化的反相高效液相色谱法检测能量代谢 RAS基因在K562细胞凋亡中的作用研究 人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TR 壳聚糖纳米粒作为基因治疗载体的研究 人细胞增殖相关激酶Plk3/Prk基因的表达 SY1磷酸酶基因的原核表达及其单克隆抗 可溶性DC 一种苦荞过敏性贮藏蛋白的研究 弓形虫GRA1基因真核表达载体的构建及其 基于半乳糖修饰的聚乙烯二氨基三嗪共聚 【中文摘要】目的 探讨用改良SYBR green Ⅰ实时定量PCR(RQ-PCR)技术,消除引物二聚体(PDs)对定量分析的影响,建立准确的定量检测DNA含量的方法。 方法 以β-actin为目的基因,通过对扩增产物和PDs熔解曲线的分析找出各自的解链温度(Tm),选择在高于PDs Tm但低于目的片段Tm的温度时检测荧光信号,建立改良SYBR green Ⅰ RQ-PCR方法。用此法构建了标准曲线,并检测了该法用于DNA定量的精确性和稳定性。 结果 该法可消除PDs对SYBR green Ⅰ实时定量PCR的影响。所得标准曲线斜率为-3.178866,相关系数为-0.980535,PCR反应动力学范围达5个log值(10~-10~6);精确性检测中,DNA含量实测值与预测值的差异无显著性(P>0.05);稳定性检测中,三种不同浓度标本的批内变异和批间变异分别为1%、3%、2%和2%、4%、4%。 结论 改良SYBR green Ⅰ实时定量PCR可有效消除PDs对定量分析的影响,对目的基因DNA拷贝数进行PCR反应线性范围广、敏感性高、精确性佳、稳定性好的定量检测。是一种简便实用的DNA定量检测的方法。

    上一篇:浅论从国际收支平衡表看我国产业结构存在的题

    下一篇:承德公安缉枪治爆行动收缴枪支102支雷管2871枚